氨苄青霉素抗性基因是什么「氨苄青霉素抗性基因」

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氨苄青霉素抗性基因作用是

氨苄青霉素抗性基因（Ampicillin resistance gene, ampr） 氨苄青霉素抗性基因是基因操作中使用最广泛的选择标记，绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。青霉素可抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合并抑制其活性，抑制转肽反应。氨苄青霉素抗性基因编码一个酶，该酶可分泌进入细菌的周质区，抑制转肽反应并催化 β-内酰胺环水解，从而解除了氨苄青霉素的毒性。

细菌中抗性基因（如抗氨苄青霉素基因）的作用机理是什么？

细菌抗药性产生有几种原理

1 分解抗生素，如抗贝塔内酰胺类的抗生素基因，是产生一种能够分解抗生素的酶

2 将抗生素运出细胞，比如LMRA基因可以产生一种将林可霉素运出细胞外的酶

3 阻断与抗生素的作用位点，如将某个位点进京修饰使得抗生素难以识别等

质粒的选择标记有哪些基因？

抗生素抗性基因是目前使用最广泛的选择标记。（1）氨苄青霉素抗性基因：氨苄青霉素抗性基因（Ampicillin：resistance：gene，emphasis：role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis）是基因操作中使用最广泛的选择标记，绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。它基因编码一种酶，该酶可分泌进入细菌的周质区，抑制转肽反应并催化β-内酰胺环水解，解除了氨苄青霉素的毒性，从而赋予含有该质粒的细菌在氨苄青霉素培养基上的抗性，实现选择目的。

（2）四环素抗性基因：四环素可与核糖体30S亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核糖体的转位。四环素抗性基因（tetracycline：resistance：gene，emphasis：role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis）编码一个由399个氨基酸组成的膜结合蛋白，可阻止四环素进入细胞。pBR322质粒除了带有氨苄青霉素抗性基因外，还带有四环素抗性基因（link：xlinkhref=i010501图4-3link）。

（3）氯霉素抗性基因：氯霉素可与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成。目前使用的氯霉素抗性基因（chloramphenicol：resistance：gene，emphasis：role=italiccmsuperscriptrsuperscript，catemphasis）来源于转导性P1噬菌体，编码氯霉素乙酰转移酶，在乙酰辅酶A存在的条件下，该酶催化氯霉素形成氯霉素羟乙酰氧基衍生物，使之不能与核糖体结合而使细菌存活。

（4）卡那霉素和新霉素抗性基因：卡那霉素和新霉素是一种脱氧链霉胺氮基糖苷，都可与核糖体结合并抑制蛋白质合成。卡那霉素和新霉素抗性基因（kanamycinneomycin：resistance：gene，emphasis：role=italickansuperscriptrsuperscriptemphasis）实际就是一种编码氨基糖苷磷酸转移酶（aminoglycoside：phospho：transferase，APH，25ku）的基因，氨基糖苷磷酸转移酶可使这两种抗生素磷酸化，从而干扰了它们向细胞内的主动转移。在细胞中合成的这种酶可以分泌至外周质腔，保护宿主不受这些抗生素的影响。

一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因

按照你的表述，EcoRI酶切位点是在卡那霉素抗性基因内部？

那么，如果这个抗性基因插入了你的目的基因，那么这个基因就被破坏，也就失去了卡那抗性。

所以，插入了目的基因的质粒，应该是只有氨苄抗性的。所以转化之后涂平板，不能用双抗，只能用氨苄抗性。

要鉴别是否插入目的基因，很简单：

1，菌落pcr：从转化平板上随机挑选几个菌落，用普通pcr体系，以菌体为模板，做pcr，然后跑胶鉴定。(我的经验，这一步阳性了就基本准了)

2，从菌落pcr阳性菌内提质粒酶切鉴定。（这个最准）

3，如果你实在是要求用抗性来筛（其实抗性筛选不是很准），你用两种平板，一种是amp平板（也就是转化用的平板），一种是amp+kan平板，你用接种环或者灭过菌的牙签，从amp转化平板上的菌落点一下，再在amp

+kan平板上原位点一下，培养。

如果同一个菌落，只能在amp上长，而不能在双抗上长，就可能是重组质粒。

关于氨苄青霉素抗性基因的内容到此结束，希望对大家有所帮助。